¿COMO REPRODUCCIRSE ENTRE HOMBRES?

O como usar al genetica y la epigenetica para convertir un espermatozoide en ovulo y reproducirse sin necesidad de mujeres.

Luis Arbaiza
Biologo genetista
UNMSM

1.- INTRODUCCION
un embrion es fruto de la union de un espermatozoide y un ovulo.


Para que dos hombres tengan un hijo entre ellos la idea es unir dos espermatozoides en un ovulo vacio (23 cromosomas de uno mas 23 del otro y ya temos 46 cromosomas)
Pero.
¿como vaciar un ovulo?
¿como meter un segundo espermatozoide en un ovulo?, pues una vez ingresado uno el ovulo impide entren más de uno.



En los años 70 se unieron en un experimento dos pronucleos masculinos (cada uno con 23 cromosomas), el desarrolo embrionario se inicio.


Un espermatozoide y un ovulo son genéticamente iguales, todos tenemos por eso los genes(agrupados en cromosomas) por duplicado, uno del padre y otro de la madre. la,informacion genetica esta duplicado, asi si uno falta el otro lo cubre.

la informacíon de ovulo y espermatozoide son iguales, al sumar sus mitades(23 cromosomas cada una) se completa la información para hacer un ser humano.

Un espermatozoide y un ovulo son genéticamente iguales, pero diferentes epigeneticamente.
Esta diferencia se llama imprinting. Habiendo un imprinting materno y otro paterno.
La unión de dos gametos, uno con imprinting materno y otro paterno permite el desarrollo normal del embrión.
El imprinting significa que determinados de genes, involucrados en este proceso, estén apagados o prendidos según un patrón típico y estándar, en función si están en el espermatozoide o en el ovulo maduros.
Los genes que están encendidos en un gameto están apagados en el otro tipo de gametos.
Y esto los hace funcionalmente diferentes. En general los genes expresados en el imprinting paterno elevan el desarrollo fetal mientras que la maternal lo limita.
(Paolini 2004)


la mitad de los genes provienen de nuestra madre y la otra mitad de nuestro padre, son copias iguales asi que tenemos nuestros genes por duplicado(por si uno falla). Pero mitado más de cerca son fucionalmente distintos. en rosa los genes(cromosomas ) de origen materno, y los genes de origen paterno en azul

La unión de gametos con el mismo imprinting, lleva a diversos defectos epigenéticos y hace inviable el desarrollo embrionario.
La inmadures de este proceso leva defectos epigenéticos.

Pero ¿que causa et diferencia epigenética?
Aun no se puede responde por completo a esta pregunta.

La motivación de esta investigación bibliográfica es elaborar una hipótesis sobre la causa del imprinting y acaso hallar experiencias que sustenten experimentalmente dicha hipótesis.

JUSTIFICACION
La impronta genética es un requisito para el desarrollo normal de los embriones
Como esta se realiza en la línea germinal, su error debe llevar errores que impiden el desarrollo exitoso de los embriones.
En especial en aquellos procedimientos como el ICSI que “saltan” pasos de los procesos epigenéticos en el gameto masculino.
Esto pude explicar por que se ha demostrado mayor porcentaje de enfermedades epigenéticas en niños concebidos con ICSI
y que se aya encontrado defectos en la metilación de los genes H19 y MEST en oligozospermicos (C.J. Marques 2008) Esto podría explicar también la aparición aumentada del sindrome Silver–Russell en niños con hipo-metilación del gen H19 nacidos de ART. (C.J. Marques 2008)


Además una baja metilación del sitio de unión podría llevar a una inactivación del gen IGF2 paterno y estar relacionado a la baja calidad embrionaria y bajo peso, asociados a menudo en ART (artificial reproduction thecnologuies). (C.J. Marques 2008)

3.- DELIMITACION DEL PROBLEMA
Para al elaboración de una hipótesis sobre la causa del imprinting hay que recorrer diversas áreas aún mal investigadas de este fenómeno, que pueden ser agrupadas en investigaciones que responden a ciertas preguntas, ninguna con una completa y suficiente respuesta:

3,1 ¿Qué genes son estos?
3.2 ¿Cuándo se modifican?
3.3 ¿Quien los modifica?
3,4 ¿como los modifica?
3.5 ¿Cual es la causa no causada del imprinting? ¿Es genética o epigenética?
3.6 ¿Cuál es la relación con el gen Sry que obviamente es el única diferencia entre genoma masculino y femenino y ah de ser el punto de partida de esta diferenciación?

MATERIALES Y MÉTODOS
Se analizo la bibliografía existente en temas relacionados para intentar responder las preguntas de la investigación para lo que se accedió a bibliotecas virtuales y a programas informáticos de manejo de data, así como la comunicación virtual con investigadores en área.

RESULTADOS

3,1 ¿QUÉ GENES SON ESTOS?
Hay un genoma del imprinting, unos 156 posibles nuevos genes, y el status de imprinting-gene puede ser predicho por su secuencia (Luedi, P.P. et al. (2007). El mecanismo clásico de impronta genética de un gen es la metilación pero no es el único y no necesariamente significa inactivación.
Aquí una relación de algunos genes conocidos como involucrados en el imprinting humano.

Cromosoma ubicación GEN Estado en el espermatozoide Estado en el ovulo Activador función
1 NOEY2
activo (supresor de tumores)
IGF2 activo Control independiente de los demas, su cambio arrastra numerosos genes más
7p12 (GRB10) in growth factor receptor protein 10
7 q21 PEG10 inactivó activo Quizás sea un nuevo gen para imprinting


7q31.3 MEST isoformas 1 and 2,
8 KCNK9 (activo en el cerebro causa cancer, bipolar y epilepcia)
8p23 DLGAP2 (posible supresor de tumores de vejiga)
DLGAP2
associated protein-2 (Dlgap2).
was excluded as the gene responsible for EPMR.
11 H19
inactivo activo Rna no codificante
Rol en cancer
a member of the AP2 transcription factor family

E2F1 transcription factor

Posiblemente uan control diferente a los de los demas
Su cambio arrastar otros genes mas

11 p57, Kip2 CDKN1C
activo
14 q MEG3,
15 q11-q13 SNRPN activo (ribonucleoproteína nuclear pequeña, polipéptido N)
15 q11-q13 IPW No polypeptide
functions RNA.
predominantly in brain
15 UBE3A causes Angelman syndrome. on the mother's chromosome
19q13.4 Possible llave maestra
X XIST activo
inactivo
Idice que esa metilacion se remueve en la spermatogenesis Xist(es en raton)

NESP55
ATP10A
PHLDA2
NDN
MAGEL2
SNRPN inactivo
PEG3
KCNQ1
KCNQ1OT1
CDKN1C
TP73
IGF2R
WT1
SLC22A18




3.2 ¿CUÁNDO OCURRE EL IMPRINTING?

Durante el desarrollo de células germinales primordiales el patrón de imprinting se borra. Probablemente al entrar a la gónada.


ESPERMATOGENESIS
Se completa en la fase haploide (meiosis) en el hombre ocurre antes de la meiosis tan pronto como cuando proliferan las espermatogonias, según algunos autores es intrinseca y cell-autonomous.

OVOGÉNESIS
El imprinting ocurre en ocytes alrededor del tiempo de la primera división meiotica, la metilación en la mujer ocurre en el desarrollo post natal cuando los ooccitos están en diploteno prophase I, el imprinting materno en continuamente establecido en la maduración del oocytes.

Pero la metilación puede ser en diferentes momentos para diferentes genes (Paolini 2004)

Se ha comprobado que no se debe a la influencia de las células somáticas de la cresta genital o el ambiente de la gónada en las células primordiales. (Paolini 2004)

IMPRINTING Y DESARROLLO

Tiempo ETAPA TIEMPO ESTADO DEL IMPRINTING ESPERMATOGENESIS OVOGENESIS
0 ZYGOTO

SE EXAGERA LA DIFERENCAI DEL IMPRINTING
La metilación paterna se desmetila brevemente después de la fertilización, la materna sufre metilaciones de novo
4 horas
En ratón el pronucleo paterno es desmetilado dentro de las 4 horas posteriores a la fertilización

4 horas
Una desmetilacion global ocurre en la morula a las 4 h de fertilización.



5 días
En el blastocisto reestablece la metilación en la inner cell mass pero no en el trophectoderm. En el blastocisto se reestablesce la metilación en la inner cell mass pero no en el trophectoderm. ( Kierszenbaum AL. 2002)


MASH2 regula el desarrollo de spongiotrophoblast
Igf2 se ha encontrado en labyrinthine trophoblast
ASCL2 se expresa en spongiotrophoblast y labyrinthine

3-4 semanas Primordial germ cells as PGCs Tienen imprinting materno-paterno migran Las Primordial germ cells heredan un imprinting bialelico de padre y madre, y borran su imprinting para empezar uno de novo durante la gametogenesis. ( Kierszenbaum AL. 2002)
Las células germinales primordiales expresan estos genes: Blimp1, Oct3/4, Fragilis, Stella, c-Kit, Mvh, Dazl and Gcna1 (Deshira Saiti 2000)


H19 y Igf2 se expresan en endodermo y mesodermo, (Andrea L. Webber1 1998)

6 semana Embrionic germ cells
No tienen imprinting o esta desregulado, ya están en gónada
40 células primordiales se destinan a ser gónada inducidos por tejidos exra-embrionarios Se hipotetiza que esa celulas reprimen el programa de somatización
Blimp1 (o Prdm1), que es un represor de tarscripcion ayuda a esa fundación (Yasuhide Ohinat 2005 )


al nacer y en unos meses Se completa el imprinting paterno
pubertad Inicio de esperamatogenesis. La paternalisacion es un proceso continuo en las mitotically-dividing spermatogonial stem cell y meiotically-dividing spermatocyte progeny derivada ( Kierszenbaum AL. 2002)
Dnmt3L, y Dnmt3b, interactúan con Dnmt2a y Dnmt3b y es requerida para una correcta espermatogenesis. ( Kierszenbaum AL. 2002)


MADUREZ El imprinting ya esta maduro en las stem cell en las línea germinal (C.J. Marques 2008)

Spermatogonia son germ cells inmaduras hacen mitosis
Algunas se diferencian hasta primary spermatocytes.
Después de la primera meiosis se vuelven 2 secondary spermatocytes


Estos hacen meiosis 2 y forman 2 espermatidas





Espermatogonia (diploide) Estas en speramtozoides ya esta metilado H19

3.4 ¿QUIEN LOS MODIFICA?

Los genes a improntar generalmente son metilados en su promotor, lo que los inactiva. (la metilación es la incorporación de un grupo metil en un carbón del nucleótido)
La metilación no siempre es silenciamiento
La metilación cambia estructura de cromatina
Un patrón de metilación es el resultado de:
1.- d e novo metilaciones
2.- mantenimiento
3.- desmetilacion
(Paolini 2004)



Los promotores de los genes a improntar son ricos en islas CpG

Las enzimas que hacen esta metilación son 3 DNA methyltransferases :
DNMT 1
Dnmt3a
Dnmt3b

Por ejemplo DNMT 1 cataliza la transferencia de un grupo metilo (CH3) desde S-adenosylmethionine (SAM) al carbón 5 de la citosina resultando una 5-Methylcytosine .

Estas islas metiladas son susceptibles de ligarse a proteínas (por ejemplo MECP2 "methyl CpG-binding protein 2)

Dnmt3a y Dnmt3b dan metilaciones de novo
Dnmt1 al dividirse el dna produce una nueva metilación en la hebra hija

La desmetilacion ocurre en ausencia de Dnmt1 con continuos ciclos de de replicación del ADN (desmetilación pasiva), pero también activamente (sin replicación del DNA). La naturaleza de las desmetilasas es aun desconocida.

DNMT3L asiste a las metilaciones de novo

DNMT3a y DNMT3b parecen ser las que dan patrones de metilación en el embrión temprano
DNMT1 es la que mantiene ese patrón de célula madre a hija (ambas copias)


3.5¿CUAL ES LA CAUSA NO CAUSADA DEL IMPRINTING?

Es de suponer que dado que los genes a improntar son numerosos (quizás cientos) y que no todos se modifican simultáneamente, hay una cascada de reacciones que lleva esta modificación gradualmente hasta su total maduración.
La información bibliográfica da cuenta de ciertas etapas de este proceso en cascada sin poder vislumbrar el gatillador de este fenómeno total. Aunque es razonable que se remonte a la ausencia o presencia de gen sry, único gene que diferencia los genomas femeninos y masculinos y que determinaría en ultima instancia la gametogénesis o la ovogénesis.


FRAGMENTOS DEL PROCESO DE MADURACIÓN DEL IMPRINTING


causa consecuencia
La expresion del gen KCNQ1OT1 del cromosoma 11p15.5, es esencial para el imprinting de ciertas regiones. El mecanismo puede ser un gen se activa en un entorno digamos ovárico o espermático y este produce el imprinting en cascada en otro genes.
Estudiando sus factores de transcricion se podría lograr saber cual la causa primera del imprinting

IG-DMR La ergenic germline-derived differentially methylated region (IG-DMR) es candidatopara region control del cromosoma 12
Es un cluster que contiene:
paternally expressed protein-coding genes Dlk1 y Dio3 y varios non-coding RNAs, de expression maternal incluido Gtl2 y C/D snoRNAs.
A retrotransposon-like gene (Rtl1) is expressed from the paternal chromosome and has an antisense transcript expressed from the maternal chromosome containing two microRNAs with full complementarity to Rtl1

Delección de IG-DMR del cromosoma materno causa la perdida del imprinting en todos los genes del cluster
La delección paterna deja intacto el imprinting

19q13.4 Unas mujeres carecen de un pedazo de cromosoma: 19q13.4 y su patrón de imprinting en sus óvulos es paterno


EXPERIENCIAS QUE DAN EVIDENCIA INDIRECTA SOBRE LA CAUSA DEL IMPRINTING
Algunos experimentos llevados a cabo con otras finalidades a la búsqueda de las causas del imprinting pueden dar evidencia experimental sobre algunos aspectos de esta
Su análisis puede llevar a haces hipótesis y/o a sustentarla experimentalmente de modo indirecto

EXPERIMENTO DE 2 MADRES
En el 2004 investigadores japoneses obtuvieron ratones crías de dos madres hembras.

El CIGOTO lo hicieron con un genoma maduro y otro inmaduro (Tomohiro Kono 2004) El oocito no desarrollado era de un ratón mutante con una deleccion de 13-kilobases
El no desarrollado es (ng)
Y el desarrollado (fg)
Pero en el ng no se altero H19 y Igf2
Para bloquear H19 en ng se uso un ratón con una deleción en ese gen
Los embriones nacieron a los 17.5 días
Se confirmo que estos embriones no pasan del día 17.5
Los 2 nacieron con crecimiento retardado tenían un hígado poco desarrollado
Igf2 y H19 Así como Dlk1 y Gtl2 Son impresos en la espermatogenesis.

De esto podemos concluir que la metilacion materna ocurre en la maduración del oocito y que el occito inmaduro es homologo a un espermatozoide epigeneticamente hablando.
Y que, por otro lado el imporntin de los genes H19 y Igf2 es independiente y hallan su causa en la region de 13-kilobases

MODIFICACION ARTIFICIAL DEL IMPRINTING

Algunas sustancias como el synthetic estrogen, diethylstilbestrol (DES) pueden cambiar el patrón de metilación del DNA.( John A. McLachlan, 2001)
La expresión de los genes impresos y el desarrollo del feto es influenciada por la adición de suero fetal de ternera al medio de cultivo (Paolini 2004)
No se sabe como este medio afecta el imprinting
Quizás remueve los grupos metilos, llevando a incompletar o a borrar el patrón de imprinting. (Paolini 2004)


ICSI E IMPRINTING
Los hijos del ICSI pesan menos (Paolini 2004)

EXPERIMENTO DEL ESPERMATOZOIDE FEMENINO
Primero Células madre se convirtieron en espermatozoides que preñaron
(Nayernia K 2006)
Células de medula se trasformaron en células germinales masculinas hubo expresión de marcadores de células germinales (Nayernia K. 2007)
El ratón nacido tenia defectos y se uso químicos especiales y vitaminas

MUJER PRODUCTORA DE ESPERMATOZOIDES
Hay un locus para molas idatiformes 19q13.4. Examinaron la metilación en las hijas y en la mola
La mutación se heredo del abuelo o la abuelo materno por lo que se concluye que el error no se debe a un borrada de las marcas de imprinting si no mas bien al reestablecimiento de marcas maternas en la ovogénesis o en su post-cigotic mantenimiento (El-Maarri O 2003)

CONCLUSION
Del análisis se ha podido generar la síguete hipótesis

HIPOTESIS
Existen dos mecanismos mutuamente independientes que inician la cascada de eventos que llevan al patrón de imprinting paterno o materno.
1.- Un gen en 19q13.4 es responsable de feminizaría un número muy significativo de genes a imprimir
Y otro alteraría H19 y Igf2

DISCUSIÓN
Hay al parecer dos mecanismos locomotora de los que depende el imprinting esos mecanismos deben estar relacionados a la presencia o ausencia del gen SRY aunque dicha relación aún es nebulosa.
Se conoce que algunas enzima son responsables de metilar los genes a improntar, además que estos genes son ricos en islas CpG pero dado que en un gameto son metilados y en otro no, siendo iguales cabe preguntarse ¿como sabe esa enzima que genes metilar y cuales no? Y además como sabe cuando metilar si esta en un espermatozoide o en un ovulo. Algo además de estas enzimas señalaría una diferenta o activa estas enzimas

El mecanismo puede ser un gen se activa en un entorno digamos ovárico o espermático y este produce el imprinting en cascada en otro genes.
Se debería estudiar lo abortos de icsi y de art para ver como están epigeneticamente al alterar estas técnicas la normal maduración del imprinting en los gametos. Ya hay evidencia de una mayor taza enfermedades epigeneticas en ARTs
Delección de IG-DMR del cromosoma materno causa la perdida del imprinting en todos los genes del cluster lo que lo señala como un gen locomotora de imprinting.
La delección paterna deja intacto el imprinting
Unas mujeres carecen de un pedazo de cromosoma: 19q13.4
Ese gen sano feminizaría óvulos. Podría feminizar los espermatozoides
H19 y Igf2, al parecer, son impresos por un mecanismo independiente de este.
Si se logra la expresión correcta de igf2 y de ha19 un número amplio de otros genes se pone bien (ósea de materno pasa a paterno)
Del experimento de los ratones con dos madres se puede deducir las siguientes cosas:

-Se puede concluir que un ovocito inmaduro es como un espermatozoide excepto por 2 genes (igf2 y h19)
-Se anulo uno de ellos (h19)para conseguir el espermatozoide
-por lo tanto un espermatozoide es como un ovocito inmaduro excepto por 2 genes
-Si se agrega los factores de maduración del ovulo y se anula igf2 podría convertir un espermatozoide en ovulo.

Al parecer pesan menos ivf, eso habla de que ganan los genes maternos osea que los genes paternos están incompletos

MUJERES PRODUCTORAS MDE ESPERMATOZOIDES

Si hay una mutación que convierte el genoma materno en paterno:
1.- Un elemento simple determina la paternidad o maternidad del genoma
2.-ese gen sano feminizaría los espermatozoides.
3.- la partenisación del genoma requiere la no activación o la supresión de ese gen o factor.
El estado normal quizás es paterno
Primero hay que borrar y después imprimir
Podemos hipotetizar que el factor de desarrollo folicular además de un silenciamiento del gen igf2 puede cambiar el imprinting paterno de los espermatozoides a materno



BIBLIOGRAFIA

Arie Mira l1, Edward Robinson2, John R. McCarrey2 & Howard Gamete−specific methylation correlates with imprinting of the murine Xist gene Nature Genetics 9, 312 - 315 (1995)

Arie Mira l1, Edward Robinson2, John R. McCarrey2 & Howard Cedar1 Gamete−specific methylation correlates with imprinting of the murine Xist gene Nature Genetics 9, 312 - 315 (1995)

C.V. Beechey GENETIC AND PHYSICAL IMPRINTING MAP OF THE MOUSE
and B.M. Cattanach Mammalian Genetics Unit, Harwell, Didcot, Oxon OX11 ORD, UK

El-Maarri O, Seoud M, Coullin P, Herbiniaux U, Oldenburg J, Rouleau G, Slim R Maternal alleles acquiring paternal methylation patterns in biparental complete hydatidiform moles Hum Mol Genet 2003; 12:1405-13
2003

El-Maarri O, Slim R Familial hydatidiform molar pregnancy: the germline imprinting defect hypothesis? Curr Top Microbiol Immunol 2006; 301:229-41 2006

Horsthemke, B Gerald F. Bai-Lin Wu,1,2 and Bernhard Horsthemke5Charité, Am J Hum Genet. 2002 July; 71(1): 162–164. Intracytoplasmic Sperm Injection May Increase the Risk of Imprinting Defects

Kaomei Guan1,4, Karim Nayernia2,4, Lars S. Maier1, Stefan Wagner1, Ralf Dressel3, Jae Ho Lee2, Jessica Nolte2, Frieder Wolf1, Manyu Li2, Wolfgang Engel2 & Gerd Hasenfuss Pluripotency of spermatogonial stem cells from adult mouse testis Nature 440, 1199-1203 (27 April 2006) 2006

Kierszenbaum AL. Genomic imprinting and epigenetic reprogramming: unearthing the garden of forking paths. 2002
Mol Reprod Dev. 2002 Nov;63(3):269-72.

Lin SP, Youngson N, Takada S, Seitz H, Reik W, Paulsen M, Cavaille J, Ferguson-Smith AC. Asymmetric regulation of imprinting on the maternal and paternal chromosomes at the Dlk1-Gtl2 imprinted cluster on mouse chromosome 12. 2003Nat Genet. 2003 Sep;35(1):11-2.

Luedi, P.P et al. Computational and experimental identification of novel human imprinted genes. (2007) Genome Res 17:1723-1730].
Manning Martina a, Willy Lissensb, Wolfgang Weidnera, Inge Liebaersb DNA Methylation Analysis in Immature Testicular Sperm Cells at Different Developmental Stages
Vol. 67, No. 2, 2001
MANNING Martina; LISSENS Willy ; LIEBAERS Inge ; VAN STEIR TEGHEM André ; WEIDNER Wolfgang ; Imprinting analysis in spermatozoa prepared for intracytoplasmic sperm injection (ICSI) International journal of andrology
2001, vol. 24, no2, pp. 87-94 (17 ref.)

McLachlan John A. , Mathew Burow, Tung-Chin Chiang and Shaun Fang Li
Gene imprinting in developmental toxicology: a possible interface between physiology and pathology 2001 Toxicology Letters
Volume 120, Issues 1-3, 31 March 2001, Pages 161-164

Marques C.J. 1, P. Costa1, B. Vaz1, F. Carvalho1, S. Fernandes1, A. Barros1,2 and M. Sousa Abnormal methylation of imprinted genes in human sperm is associated with oligozoospermia2008 Molecular Human Reproduction 2008 14(2):67-74;

Nayernia K. Drusenheimer N, Wulf G, Nolte J, Lee JH, Dev A, Dressel R, Gromoll J, Schmidtke J, Engel W, Putative human male germ cells from bone marrow stem cells. Soc Reprod Fertil Suppl. 2007;63:69-76.

Nayernia K., Lee J.H., Drusenheimer N., Nolte J., Wulf G., Schwandt I., Ralf D., Müller C.H., Gromoll J., Engel W. Derivation of germ cells from bone marrow stem cells. Lab Invest Volume: 86 Pagination: 654-6632006

Nayernia K, Vauti F, Meinhardt A, Cadenas C, Schweyer S, Meyer BI, Schwandt I, Chowdhury K, Engel W, Arnold HH. Inactivation of a testis-specific Lis1 transcript in mice prevents spermatid differentiation and causes male infertility.
J Biol Chem. 2003 Nov 28;278(48):48377-85. Epub 2003 Sep 16.

Nayernia K.Lee J.H., Engel W., Stem Cell Protein Piwil2 Modulates Expression of Murine Spermatogonial Stem Cell Specific Genes.
Mol Reprod Dev. Volume: 73 Number: 2 Pagination: 173-1792006

Nayernia K, Nolte J, Michelmann HW, Lee JH, Rathsack K, Drusenheimer N, Dev A, Wulf G, Ehrmann IE, Elliott DJ, Okpanyi V, Zechner U, Haaf T, Meinhardt A, Engel W.In vitro-differentiated embryonic stem cells give rise to male gametes that can generate offspring mice. Dev Cell. 2006 Jul;11(1):125-32

Nayernia K, Lee JH, Drusenheimer N, Nolte J, Wulf G, Dressel R, Gromoll J, Engel W.Derivation of male germ cells from bone marrow stem cells.
Lab Invest. 2006 Jul;86(7):654-63. Epub 2006 May 1.

Paoloni Ariane -Giacobino1 and J Richard Chaillet Genomic imprinting and assisted reproduction Reprod Health v.1; 2004


Saiti Deshira and Orly Lacham-Kaplan Mouse Germ Cell Development in-vivo and in-vitro Tomohiro Kono1,3, Yayoi Obata1,3,
Quiong Wu1,3, Katsutoshi Niwa1,3,Yukiko Ono1, Yuji Yamamoto2,3, Eun
Sung Park4, Jeong-Sun Seo4,5& Hidehiko Ogawa1,3 Birth of parthenogenetic mice that can develop to adulthood2004 NATURE | VOL 428 | 22 APRIL 2004

Webber Andrea L. 1, Robert S. Ingram1, John M. Levorse1 and Shirley M. Tilghman1 Location of enhancers is essential for the imprinting of H19 and Igf2 genes199Nature 391, 711-715 (12 February

Yasuhide Ohinata1,7, Bernhard Payer2,7, Dónal O'Carroll3,7, Katia Ancelin2, Yukiko Ono1, Mitsue Sano1, Sheila C. Barton2, Tetyana Obukhanych4, Michel Nussenzweig4, Alexander Tarakhovsky3, Mitinori Saitou1,5,6 & M. Azim Surani2 Blimp1 is a critical determinant of the germ cell lineage in mice2005 Nature 436, 207-213 (14 July
2005)e